錐蟲藍

即台盼藍。細胞活性染料,常用於檢測細胞膜的完整性。還常用於檢測細胞是否存活。

基本介紹

  • 中文名:錐蟲藍
  • 英文名:Trypan Blue
  • 化學式:C34H24N6O14S4Na4
  • 分子量:960.82
基本性質,2機理,3步驟,4其他,

基本性質

中英文名稱:台盼藍(Trypan Blue)或稱台盼蘭、錐蟲藍、曲利苯藍
分子式:C34H24N6O14S4Na4
分子量: 960.82
可溶於水(10mg/ml)
是細胞活性染料,常用於檢測細胞膜的完整性。還常用於檢測細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。
台盼藍可被巨噬細胞吞噬,故可用於巨噬細胞的活體染色劑

2機理

正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥台盼藍,使之不能夠進入胞內;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,可被台盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經死亡,這與中性紅作用相反。因此,藉助台盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。台盼藍是組織和細胞培養中最常用的死細胞鑑定染色方法之一。注意凋亡小體也有台盼藍拒染現象。
台盼藍染色後,通過顯微鏡下直接計數或顯微鏡下拍照後計數,就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。
台盼藍染色只需3-5分鐘即可完成,並且操作非常簡單。

3步驟

步驟:(來自supergama)
1、4%台盼藍母液:稱取4g台盼藍,加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾,4度保存。使用時。用PBS稀釋至0.4%。(也可買Gibco的成品);
2、胰酶消化貼壁細胞,製備單細胞懸液,並作適當稀釋。
3、染色:細胞懸液與0.4%台盼藍溶液以9:1混合混勻。(終濃度0.04%
4、計數:在三分鐘內,分別計數活細胞和死細胞。 1 e7 e* I* S) ^% X8 U$ K- _
5、鏡下觀察,死細胞被染成明顯的藍色,而活細胞拒染呈無色透明狀。
6、統計細胞活力:活細胞率(%)= 活細胞總數/(活細胞總數+死細胞總數)×100%

4其他

保存條件
室溫保存
說明
有潛在致癌危險
為了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。

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