乳膠凝集法( Latex agglutination test，LAT) 是以乳膠顆粒作為載體的一種間接凝集試驗。即吸附可溶性抗原於其表面，特異性抗體與之結合後，可產生凝集反應。這種方法具有獨特優點: 不需要特殊儀器、肉眼判斷、操作簡便、不需要專門培訓；檢測時間短，一般為 2 min；價格低廉，檢測單份血清樣品的成本比其它血清學和病原學方法低得多；適於現場檢測等，在臨床檢驗中被廣泛套用。
基本介紹
- 中文名：乳膠凝集法
- 外文名：Latex agglutination test
- 優點：操作簡便、檢測時間短、廉價
- 套用：病毒、細菌的快速檢測
乳膠凝集法,乳膠凝集法的套用,
乳膠凝集法
普通聚苯乙烯乳膠和抗體的結合是無選擇性的物理靜電吸附，抗體很難結合到乳膠表面，即使致敏上的抗體也容易從乳膠微球上脫落或者變性失活，而使用多肽縮合劑或交聯劑則操作過程繁瑣、耗時。在乳膠中乳膠，通過調節 p H 值後乳膠微球表面帶有較多的電荷，易吸附抗體。將單克隆抗體吸附到乳膠表面，製備乳膠抗體複合物診斷試劑。這種方法克服了普通乳膠致敏抗體的缺點，不需使用交聯劑，提高了抗體的結合效率，而且致敏上的抗體不容易從乳膠上脫落，進而提高乳膠的敏感性和保質期，適合產品開發和大規模生產的要求。
乳膠凝集法的套用
乳膠凝集法可用於豬圓環病毒的快速檢測。本方法在實際套用方面具有顯著的優勢: 靈敏度高、特異性強、檢測成本低、操作簡便、快速、結果穩定。同其它檢測方法相比，本方法不需要專業技術，檢測耗時短，更適用於PCV2 的早期診斷和大規模的臨床檢測，對減少養豬業的損失意義重大。
乳膠凝集法還可快速檢出耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA），這對臨床及時使用有效的藥物進行治療，防止院內交叉感染有重要指導意義。苯唑西林鹽瓊脂篩選平皿法檢出MRSA需要一到兩天的時間，而PBP-2a乳膠凝集法檢出一例MRSA只需不到30分鐘的時間，其原理是加熱裂解將MRSA中的PBP-2a提取出來，加入PBP-2a特異性單克隆抗體致敏的乳膠顆粒溶液，出現肉眼可見的特異性凝集現象。本實驗中兩種方法的實驗結果符合率為100%，說明PBP-2a乳膠凝集法完全可以作為臨床微生物實驗室快速篩查 MRSA 的方法。
乳膠凝集法在檢測麻疹病毒Ig-M抗體也有較好套用。由於非特異的前驅症狀和輕型麻疹病例的存在,僅依據臨床表現診斷麻疹是不可靠的。隨著麻疹發病的減少,許多臨床醫師未見過麻疹或無診斷麻疹的經驗。急需實驗室診斷方法來鑑別麻疹和與其臨床表現相類似的其它疾病。麻疹在嬰幼兒中的誤診更常見,爆發的病例比散發病例更需要實驗室的確認。與麻疹相似的疾病很多,例如:風疹、登革熱、埃柯、柯薩奇、人類小脫氧核糖核酸(DNA)病毒B19、皰疹6型病毒等感染引起的疾病[8]。間接ELISA法比捕捉ELISA法的實驗流程簡單,該法已被一些國家廣泛套用。但間接法血清需預處理,吸去IgG抗體,問題是IgG抗體吸附不完全時,可導致結果不可信。麻疹IgM抗體捕捉ELISA法和噬斑減少中和實驗相比,在檢測疫苗免疫後嬰兒IgM抗體敏感性達到97%。在臨床證實的病例中,捕捉法的敏感性和特異性分別達到91.8%和98.2%[8]。陽性和陰性的可信度分別為98.2%和92.0%。市場上有許多種ELISA法捕捉IgM抗體試劑盒,但質量差別很大,不是所有的試劑盒都能達到高敏感性和特異性。
乳膠凝集IgM-PA法、捕捉ELISA法和間接ELISA法都只需要1份血清即可診斷病例,ELISA法已大量用於麻疹的實驗室診斷。結果提示,三種方法檢測麻疹可疑病例的陽性檢出率相似,差異無顯著的統計學意義。IgM-PA法檢測麻疹可疑病例的敏感性為100%,特異性為90%。檢測正常兒童血清的特異性為100%,可能IgM-PA法比ELISA法更敏感,可檢測出麻疹可疑病例中的微量抗體。IgM-PA法實際套用時,只做4個滴度定性即可。一塊96孔酶標免疫板上可做24份標本,使成本降低。PA法不需要特別的儀器設備,操作簡單,不需特別的技術和培訓,酶標板可重複使用,結果快速。IgM-PA法易在地區和縣級疾病預防控制機構開展,利於全國麻疹實驗室網路的建設。
